细胞膜染料–DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS

细胞膜染料–DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS

产品描述
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。
* Omega滤光器由Omega公司提供(www. omegafilters.com);Chroma滤光器由Chroma公司提供(www. chroma.com)。
**DiR碘化物的发射波长肉眼不可见,所以需要配备CCD镜头或其他的近红外检测仪器。

使用方法
1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备
(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
注意:未使用的储存液保存在-20 oC,避免反复冻融。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 µM的工作液。
注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2. 悬浮细胞染色
(1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
(5)重复(3),(4)步骤两次以上。
3. 粘壁细胞的染色
(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005
5. 流式细胞仪的检测
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。

储存条件:DiR碘化物-20℃干燥避光保存,有效期一年。

细胞膜荧光探针DiR,碘化物

DiR iodide [1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyanine iodide]

别名:DiR碘化物  
分子量:1013.39
溶剂:DMSO

保存:-20°C干燥避光保存
有效期:12个月

产品描述 细胞膜荧光探针DiR,碘化物产品的光谱学相关参数为Ex=748nm / Em=780nm;其对应分子量大小为1013.39MW.
产品形式 提供的细胞膜荧光探针DiR,碘化物产品为固体形式。我们建议将其溶解到二甲基亚砜(DMSO)溶液中使用或保存。
保存建议 对于 细胞膜荧光探针DiR,碘化物 产品,我们推荐使用常温进行运输.在您收到货物后,我们建议在低于-15℃温度下冷冻保存,要求储存环境干燥并避免光照.产品有效期为12个月.